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麥康凱瓊脂培養基MCA
相關瓊脂培養基的融化:培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。
經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。融化后的培養基放人47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水在鍋里的分裝量。
融化后的培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基凝固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。將瓊脂培養基倒人類似檢測培養基使用的獨立容器中,插入溫度計,記錄并保存瓊脂的融化、溫度。加入樣品的培養基應將溫度調節到44℃~47℃,或按照相關標準調節溫度。
水浴保溫的頂層培養基中依次加入測試增菌液0.1 mL(需活化時另加10%S9混合液o.5 mL),混勻,迅速傾入底層培養基上,轉動平板,使頂層培養基在底層分布均勻。
平放固化后取無菌濾紙片(直徑約為6 mm),小心放在已固化的頂層培養基的適當位置上,用移液器取適量受試物(如10μL),點在紙片上,或將少量固體受試物結晶加到紙片或瓊脂表面;37℃培養48 h觀察結果。