?。?、培養基的過濾澄清

　　液體培養基必須 澄清，瓊脂培養基也應透明無顯著沉淀，因此，須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法，濾紙應折疊成折扇或漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

　　瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去，再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60℃的培養基放入大的三角燒瓶內，裝入量不得超過燒瓶容量的1/2，每1000mL培養基加入1~2個雞蛋的蛋白，強力振搖3~5分鐘，置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。

　?。?、培養基的分裝

　　培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎（現試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時 能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時，分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒，以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20mL培養基于一小玻璃瓶中，隨該批培養基同時滅菌，以為測定該批培養基pH之用。

　?。?、培養基的滅菌

　　一般培養基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中，如無特殊規定，即可用此法滅菌。

　　某些畏熱成分，如糖類，應另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應以無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃左右的培養基中。

　　瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出，冷至55℃-60℃時，擺置成適當斜面，待其自然凝固。

　?。?、培養基的質量測試

　　每批培養基制備好以后，應仔細檢查一遍，如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其pH。

　　將全部培養基放入36±1℃恒溫箱培養過夜，如發現有菌生長，即棄去。

　　用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基，培養24~48小時，如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次，如結果仍同前，則該批培養基即應棄去，不能使用。

　　10、培養基的保存

　　培養基應存放于冷暗處， 能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周，傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。