培養基的制備

　　培養基的制備過程可表示為：

　　稱量藥品→溶解→調節PH值→溶化瓊脂→過濾分裝→包扎標記→滅菌→擺斜面或倒平板。

　　1、稱量藥品;根據培養基配方依次準確稱取各種藥品，放入適當大小的燒杯中，瓊脂不要加入。蛋白胨易吸潮，故稱量時要迅速。

　　2、溶解：用量筒取一定量（約占總量的1/2）蒸餾水倒入盛有藥品的燒杯中，在放有石棉網的電爐上小火加熱，并用玻璃棒攪拌，以防液體溢出。待各種藥品完全溶解后，停止加熱，補足水分。如果配方中有淀粉，則先將淀粉用少量冷水調成糊狀，并在火上加熱攪拌，然后加足水分及其他原料，待完全溶化后，補足水分。

　　3、調節PH值：根據培養基對PH值的要求，用50g/LNaOH或5%（體積分數）HCl溶液調至所需的PH值。測定PH值可用PH試紙或酸度計等。

　　4、溶化瓊脂：固體或半固體培養基須加入一定量的瓊脂，將盛有培養基的器皿置于電爐上一面攪拌一面加熱，直至瓊脂完全溶化后才能停止攪拌，并補足水分（水需預熱）。注意控制火力不要使培養基溢出或燒焦。

　　5、過濾分裝：先將過濾分裝裝置安裝好。如果是液體培養基，玻璃漏斗中放一層濾紙；如果是固體或半固體培養基，則須在漏斗中放多層紗布，或兩層紗布夾一層薄薄的脫脂棉趁熱進行過濾。過濾后立即進行分裝。分裝時注意不要使培養基沾染在瓶口或管口，以免浸濕棉塞，引起污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝量為管高的1/5，半固體分裝量一般以試管高度的1/3為宜，分裝三角瓶，以不超過三角瓶容積的一半為宜。

　　6、包扎標記：培養基分裝后加好棉塞或試管帽，再包上一層防潮紙，用棉繩系好。在包裝紙上標明培養基名稱、制備組別和實驗者姓名、日期等。

　　7、滅菌：上述培養基應按培養基配方中規定的條件及時進行滅菌。普通培養基為121℃，20min，以保證滅菌效果和不損傷培養基的有效成分。如需要作斜面固體培養基，則滅菌后立即擺放成斜面。斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。