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微生物培養基是微生物生長、繁殖和代謝的混合營養養料。由于微生物的營養類型不同,對營養物質的要求不同,研究目的不同,所以培養基種類繁多,使用的原料也不同。但從營養角度來說,微生物培養基一般含有微生物必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素和水。此外,培養基還應具有合適的pH值、一定的緩沖容量、一定的氧化還原電位和合適的滲透壓。為了滿足研究的具體要求,需要對培養基進行制備和滅菌,那么微生物培養基如何制備和滅菌呢?
1.準備溶液。
向容器中加入一部分所需量的水,根據培養基的配方稱量各種原料,加入以溶解它們,Z后補足所需的水。蛋白胨、肉膏等物質需要加熱溶解,待所有原料溶解后,再加入加熱蒸發的水進行補足。
配制固體培養基時,先將配制好的液體培養基煮沸,然后加入稱量好的瓊脂,繼續加熱至完全融化,并保持攪拌,以免燒壞瓊脂糊的底部。
2.調節pH值。
用pH試紙(或pH電位器、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值。如果不符合要求,可以用10%鹽酸或10%氫氧化鈉調節,直到達到配方要求的酸堿度。
3.過濾。
趁熱用濾紙、紗布或棉花過濾準備好的介質。用紗布過濾時,要折疊成六層。用濾紙過濾時,將濾紙折疊成瓦棱柱狀,鋪在漏斗上過濾。