3培養基的實驗室制備

　　3.1總則

　　正確制備培養基是微生物檢驗的Z基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分，尤其是含有有毒物質（如膽鹽或其他選擇劑）的成分時，應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。

　　使用商品化脫水合成培養基制備培養基時，應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據，如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。

　　使用各別成分制備培養基時，應按照配方準確配制，記錄所有細節信息，如：培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積（分裝體積）、無菌措施（包括實施的方式、溫度及時間）、配置日期、人員等，以便溯源。

　　3.2水

　　除特定要求，實驗室用水的電導率在25℃下應不高于2.5μS/cm（相當于電阻率注0.4MΩcm)。

　　微生物污染應不超過103CFU/mL，較好低于102CFU/mL。

　　3.3稱量和復水

　　稱量所需量的脫水培養基（注意防止吸入粉末，尤其是含有有害物質的培養基粉末），先加入少量水，充分混合（莊意避免培養基結塊）后再加水至所需的量。

　　3.4溶解和分裝

　　脫水培養基加水后適當加熱，并不停攪拌使其快速溶解，必要時，重新溶解。含瓊脂的培養基在加熱溶解前應浸泡幾分鐘。

　　3.5 pH的測定和調整

　　用pH計測定pH，必要時在滅菌前調節pH，除特殊說明外，培養基滅菌后冷卻至25℃時，要求pH的變化不超過0.2pH單位。通常使用濃度約為40g/L（約1mol/L）的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L（約1mol/L）的鹽酸溶液調節pH。如果滅菌后調節pH，溶液需滅菌。

　　注：商品化培養基在高壓滅菌前后pH可能發生明顯變化，但使用蒸餾水或去離子水時，滅菌前無需調節pH。

　　3.6分裝

　　將配置好的培養基分裝到適當的容器中，容器的體積至少為培養基體積的1.2倍。