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    培養基的質量控制2

    2021-05-09

      3培養基的實驗室制備


      3.1總則


      正確制備培養基是微生物檢驗的Z基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。


      使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。


      使用各別成分制備培養基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節信息,如:培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。


      3.2水


      除特定要求,實驗室用水的電導率在25℃下應不高于2.5μS/cm(相當于電阻率注0.4MΩcm)。


      微生物污染應不超過103CFU/mL,較好低于102CFU/mL。


      3.3稱量和復水


      稱量所需量的脫水培養基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物質的培養基粉末),先加入少量水,充分混合(莊意避免培養基結塊)后再加水至所需的量。


      3.4溶解和分裝


      脫水培養基加水后適當加熱,并不停攪拌使其快速溶解,必要時,重新溶解。含瓊脂的培養基在加熱溶解前應浸泡幾分鐘。


      3.5 pH的測定和調整


      用pH計測定pH,必要時在滅菌前調節pH,除特殊說明外,培養基滅菌后冷卻至25℃時,要求pH的變化不超過0.2pH單位。通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調節pH。如果滅菌后調節pH,溶液需滅菌。


      注:商品化培養基在高壓滅菌前后pH可能發生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時,滅菌前無需調節pH。


      3.6分裝


      將配置好的培養基分裝到適當的容器中,容器的體積至少為培養基體積的1.2倍。


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